使用柱层层析硅胶时的几个技巧
柱分析硅胶制造商小编带您了解相关知识:硅胶分析的分离原理是基于硅胶上物质的吸附能力。一般来说,大物质容易被硅胶吸附,而弱物质不容易被硅胶吸附。整个分析过程是一个吸附、解吸、再吸附和再解吸的过程。离子交流分析、凝胶过滤分析和亲和力分析是三种分离混合物的经典分析技术。
使用柱层分析硅胶时的一些技巧:
1.硅胶的应用
在柱子分析开始时,柱子很容易安装得又长又短。有时会有大量的硅胶残留物浪费硅胶,主要是因为我们没有掌握硅胶等固定相的使用。柱子分析中使用的硅胶一般为100-200目,100ml硅胶的质量约为47g。如果柱子的直径是2.8cm,可安装高度为18cm的柱子。
2.使用洗脱剂
可通过薄层分析确定洗脱剂,RF值一般由待分离样品确定为0.2-0.3。洗涤剂的选择应大限度地提高两种相邻物质之间的价值差异。不要认为在板上爬高分离效果更好。如果在板上爬高分离效果更好,RF为0.6.即使差异为0.2,在柱子上分离也不容易。柱子分析硅胶制造商认为,由于柱子是一个反复爬行的过程,因此可以通过公式进行比较:0.6/0.8次分离肯定不如(0.2)/0.3)三次方或四次方大。
乙酸乙酯:石油醚系统;甲醇:氯仿系统;甲醇:水:正丁醇:醋酸系统;尾部可添加少量氨或冰醋酸。对于难以分离的化合物,一是增加柱的长度和直径,二是降低洗脱剂的性能,使混合物分离良好。
3.柱硅胶柱分析技巧
立柱分析的立柱安装非常重要。立柱安装的效果将直接影响分层分析的分离效果。有两种方法:湿柱和干柱。湿柱非常简单,应用广泛,即首先使用比固定剂多两倍的洗脱剂将固定相活成均匀的浆料,首先用脱脂棉塞住柱底,然后倒入洗脱剂排出脱脂棉中的气泡。
处理方法如下:(1)必须加强固定相;(2)必须使用更多的溶剂“走柱子”。
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